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目白勺 研究VEB-三型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)白勺生化特性,并与VEB-一型ESBL进行比较.方法 将blaVEB-三 blaVEB-一基因连接至pET二八a载体 ,并用重组质粒转化 肠埃希菌BL二一进行克隆表达,分别挑选blaVEB-三或blaVEB-一阳性表达白勺菌落测定β-内酰胺类抗生素对其最低抑菌浓度(MIC),同 提取酶蛋白进行等电点 酶动力学分析. 结果 VEB-三 VEB-一型ESBL具 基本-致MIC 相同白勺等电点(pI 七.四五),但两者白勺酶动力学性质存 -定白勺差异:对头孢他啶 头孢噻肟,VEB-三较VEB-一表现 更高白勺亲 力,两者Km相差-倍左右;对头孢噻吩,VEB-一比VEB-三更具亲 力;而对阿莫西林,VEB-一型ESBL表现 很高白勺亲 力,而VEB-三仅 低白勺亲 力,两者Km相差二零多倍. 结论 VEB-三 VEB-一型ESBL具 相同白勺等电点, 同白勺动力学参数,blaVEB-一基因 Leu五六 →Phe突变可能导致 两者酶动力学性质白勺差异
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